怎样进行组织培养育苗？

专家解答

组织培养繁殖法是利用细胞的全能性和组织的再生能力，切取草莓植株的部分组织或器官，在无菌条件下，接种到人工配置的培养基上，使之发育成完整的植株。草莓组织培养繁殖的优点是：

（1）植株健壮结果好任何植物在长期的无性繁殖过程中都容易感染病毒，受到病毒感染的植株生活力衰退，产量降低，品质变劣。而组织培养繁殖的整个过程是在无菌环境中进行的，对于做繁殖材料的茎尖也要进行脱毒处理，这样所得的秧苗不含或少含病毒，比一般秧苗叶片大而厚，叶色浓绿；生长健壮且整齐一致；结果期延长3周，平均增产20%左右；果个大，品质优。

（2）繁殖速度快利用组织培养法繁殖草莓，一年内一个分生组织可获得几千株甚至几万株秧苗，这种繁殖方法对加速新品种推广，特别是对抽生匍匐茎低的品种的繁殖更为有利。

（3）繁殖不受季节限制组织培养是在操作室和配套温室中进行的，不受外界环境条件的影响，一年四季均可生产，在人工控制条件下，可进行工厂化育苗。

（4）节省土地，利于种质保存用组织培养法繁殖是在实验室中进行的，对露地占用少。所以，不仅节省土地，便于管理，而且对保存种质资源更加安全。

组织培养繁殖有以下几个步骤：

（1）配制培养基常用的培养基是MS培养基、怀特培养基，其配方见表11。

①配制母液。将营养成分中大量元素扩大10倍，微量元素扩大100倍。把大量元素、微量元素、有机生长物质分别贴上标签，放在3～5℃环境中待用。植物生长调节剂如6-苄基嘌呤、激动素用少量0。5摩尔/升的盐酸溶解，萘乙酸用酒精溶解，溶解后加水稀释。

②培养基配制。将所要用的琼脂加热溶解，加入蔗糖搅拌，配制成琼脂-蔗糖液。然后按量把配制好的母液置入准备好的容器中，接着把琼脂-蔗糖液也置入同一容器中，充分搅拌，定容到规定的体积。

③调整酸碱度。琼脂培养基加热灭菌时，pH会降低0。1～0。3，所以在加热前用0。1摩尔/升的盐酸或氢氧化钠液调整培养基的pH。

④高温消毒。把培养基趁热注入试管或三角瓶内，注入量为容器容积的1/3左右，塞上棉塞，缚紧，放入高压蒸汽锅内灭菌。蒸汽锅压力维持在78。5～98千帕，时间为10～20分钟。

单位：毫克/升序号化合物硝酸钾（KNO3）硝酸铵（）四水硝酸钙[Ca（NO3）2·4H2O]-3004硫酸钠（）-2005七水硫酸镁（MgSO4·7H2O）七水磷酸二氢钠（·7H2O）-16。57磷酸二氢钾（）170-8氯化钾（KCl）-659一水氯化钾（KCl·H2O）四水硫酸锰（MnSO4·4H2O）22。37。011七水硫酸锌（ZnSO4·7H2O）8。63。0表11营养基配方序号化合物硫酸铁[Fe2（SO4）3]-2。513五水硫酸铜（CuSO4·5H2O）0。0250。氧化钼（MoO3）-0。硼酸（H3PO3）6。21。516碘化钾（KI）0。830。7517六水氯化亚钴（CoCl2·6H2O）0。二水钼酸钠（·2H2O）0。25-19肌醇烟酸0。50。321盐酸硫胺素0。40。122盐酸吡哆醇0。50。123甘氨酸2。0324蔗糖琼脂6pH5。85。6表11营养基配方（续）-1（2）选材与消毒选取健壮植株上充实、小叶尚未展开的匍匐茎先端3厘米左右的幼嫩组织作培养材料。将材料用洁净流动的清水冲洗0。5～1个小时，然后用70%的酒精浸泡1分钟，再用0。1%升汞水浸泡7分钟，最后用无菌水冲洗2～3次。

（3）接种在无菌的超净工作台上，用镊子去掉茎尖组织的叶片，在解剖镜下，用消过毒的刀片切取茎尖分生组织0。3～0。5毫米大小，放入备用的培养基上。

（4）初代培养将接过种的试管或三角瓶放置在温度25～28℃，光照强度2000勒克斯，每天照射10小时的无菌条件下进行培养。10～15天接种物开始萌发，再经7～10天接种物产生很多小芽，形成芽丛；3个月后，无根苗长至3～4厘米。这时初代培养结束。

（5）继代培养当初代培养的无根苗长到3～4厘米时，将其取出进行生根培养。把剩下没达到3～4厘米的芽，按3～4个芽为一个芽丛重新分开，再重新植入同种培养基（初代培养基）上进行增殖培养，这种增殖培养称继代培养。1个月左右新的一批无根苗又繁殖出来，再用同种方法进行下一次继代培养。

（6）生根培养将初代培养或继代培养的高度已达到3～4厘米的无根苗，扦插到珍珠岩内进行生根培养。生根培养的苗床温度保持在18～20℃，空气湿度在80%以上，珍珠岩中要喷洒营养液和生根素。20天以后，当秧苗长出3～4条，长度达1。5～2。5厘米的根系时，可进行移栽锻炼。目前国内比较常用的营养液配方见表12。

化合物名称园试配方化合物用量毫克/升毫摩/升元素含量（毫克/升）大量元素总计（毫克/升）Ca（NO3）。。。。86-B0。·4H2O2。。·7H2O0。。·5H2O0。。02（NH4）·4H2O0。。表12营养液配方注：参引2001年张福墁主编《设施园艺学》。

（7）移栽当秧苗已长出3～4条1。5～2。5厘米长新根时，可移栽到室外进行土壤育苗。移栽后的前两周应覆盖薄膜与覆盖遮阳网，保持土壤和空气湿度，缓苗后撤除覆盖物。

提示板

组织培养能培育优质的壮苗，但技术要求比较严谨，目前还只在科研院所进行。随着科技的进步[52石斛网www.52shihu.com]，大型繁育场将逐步得到推广。无毒育苗将是草莓苗木繁育的主要手段。

（1）外植体的选择。外植体是指从植物体上切取下来，用于组织培养的部分，如顶芽、茎尖、侧芽、花器、鳞片等。一般说来带芽的外植体如茎尖和侧芽等，它们产生幼苗的成功率高，而且很少发生变异，容易保持材料的优良特性。由分化组织构成的外植体，如茎段、叶、根、花茎、花瓣、花萼、胚珠、果实、花粉等，它们大多由已分化的细胞组成，由它们再生成幼苗，要有一个从分化状态回复到分生组织状态的脱分化过程，由这类外植体接种的材料，常常要经过愈伤组织阶段再分化出芽或胚状体而形成幼苗，形成的后代可能有变异。

（2）外植体的灭菌。取得外植体后必须进行严格的灭菌，这是因为外植体常常附有多种多样的微生物，这些微生物一旦被带进培养基，就会迅速滋生，使组织培养前功尽弃。在将各种微生物杀死或清除的同时，必须保持外植体的生活力。

先用流动的自来水冲洗10～20分钟，脏的外植体用洗衣粉洗涤，或用毛刷、毛笔轻轻刷洗，去掉污物，冲洗后用滤纸吸干外植体的表面水分。在70%的酒精里浸泡15～30秒钟，用无菌水冲洗两次。然后用适当的药剂消毒，经常使用的灭菌剂有次氯酸钠、过氧化氢、漂白粉和低浓度的氯化汞等。使用这些灭菌剂，都能起到表面杀菌的作用。具体使用的浓度和浸泡的时间因外植体的种类和药剂而定。如用2%～10%次氯酸钠水溶液浸泡3～15分钟。灭菌后立即用无菌水冲洗3～5次，洗去药液，用无菌滤纸吸干水分，准备分离。

（3）外植体的分离。在超净工作台上进行分离。提前15～20分钟开机，并用70%的酒精擦拭台面。点燃酒精灯用于工具的消毒。如果使用的外植体太小操作困难，可在解剖镜下进行。外植体小的用大头针将其固定在橡皮塞上，然后在解剖镜下分离切取。用无菌刀、剪、镊子等，在无菌的环境下，剥去芽的鳞片、嫩枝的外皮等，叶片不需剥皮。然后切成0。2～0。5厘米厚的小片，就可以植入培养基了。在操作过程中严禁用手触动材料。

（4）外植体的植入。在超净工作台上打开装有培养基的瓶或试管。在酒精灯的火焰上烤一下瓶口或试管口，再开启瓶盖。在无菌环境下，将切好的外植体立即接在培养基上，组织培养育苗最常用的培养基为MS。每瓶接种4～10个。再在火焰上烤一下瓶和瓶盖。接种后，立即盖上瓶盖，试管用无菌药棉塞上。及时写好记录，贴上标签。

（5）诱导。消毒后的外植体在诱导培养基上培养一段时间后可诱导出丛芽、胚状体、原球茎、根状茎，我们将这些培养材料称为中间繁殖体。外源的生长素类物质对诱导细胞开始分裂效果很好，组织培养育苗是必须使用的。最常用的为6-苄基腺嘌呤，常用浓度为1～2毫克/千克。萘乙酸、吲哚丁酸、吲哚乙酸。后3种药剂既在配制生根培养基时应用，又常在诱导、增殖和壮苗时使用。

（6）中间繁殖体的增殖。对中间繁殖体进行切割、继代培养就可以进行中间繁殖体的增殖。中间繁殖体的增殖速度随花卉的种类、培养基、培养条件的不同而异，因而对具体花卉需进行试验，找到合适的繁殖条件。当中间繁殖体增殖到一定数量后快速繁殖进入生芽、壮苗和生根阶段。如果是通过丛芽繁殖，则不需经过生芽直接进行壮苗、生根，如果是通过其他途径则需先将中间繁殖体转移到生芽培养基上，然后再转移到壮苗生根培养基上。在壮苗生根培养基上，大多数花卉要分离成单苗。

（7）生根。继代培养形成的不定芽和侧芽等一般没有根，要促使试管苗生根，必须转移到生根培养基上，生根培养基常用1/2MS培养基，无机盐浓度低有利于根的分化。同时，不同花卉诱导生根时所需要的生长素的种类和浓度是不同的，常用生长素萘乙酸、吲哚乙酸、吲哚丁酸。一般在生根培养基中培养1个月左右即可获得健壮根系。

（8）试管苗移栽。对已经生根的试管苗及时移栽是组织培养育苗的最后工作。由于组织培养苗是在无菌、有营养供给、适合光照、温度和100%相对湿度环境中生长的，因而刚出瓶的试管苗对外界环境不太适应，稍有不慎就会造成大量死苗。出瓶前1～3天打开瓶盖，让幼苗锻炼，适应外部不良环境和对病菌的适应能力，但不能太早，以免培养基生长霉菌。对刚出瓶的组织培养苗要细心管理，控制适当的温度、弱光照、较高的空气湿度、适宜的基质及对病虫害的有效控制。

（9）操作过程注意事项。在整个操作过程中，工作人员必须用肥皂和流动的自来水把手洗干净，带上口罩、帽子，穿上工作服，接种前双手用70%的酒精擦拭，工作时不说话。

甜叶菊要怎样育苗？

甜叶菊的育苗：我国因气候关系，南方温暖一般于11～12月利用塑料小拱棚播种育苗，到翌年3月中、下旬便可定植于大田。北方冬季严寒不宜秋播，一般于翌春2～4月利用塑料大棚或小棚育苗，故当年定植大田时间比南方较晚。

育苗方法按常规进行。甜叶菊种子很小，千粒重仅有0。25～0。32克，饱满的种子也超不过0。45克。甜叶菊种子发芽率低，而其外部被有短毛，它影响种子萌发。为提高出苗率，播种前可用细砂掺混种子一起磨搓，然后放在温水中浸10～12小时，并适当加大播种量，每平方米3～5克拌上草木灰均匀撒播。

播后用木板轻压床面，使种子与土壤接触，再用喷雾器向床面喷水1次，保持床土湿润，7～10天即能发芽出土。

甜叶菊种子1千克约有200万粒，但去掉夹杂物和空瘪籽，每千克饱满种子只不过60万粒左右，每100平方米苗床的播种量500克，估计能出苗25万～30万株，扣除育苗期间间苗和其他原因死去的苗株，实际能育成的壮苗为20万～25万株，大致可够栽植12～15亩土地。

当幼苗长出2～4片真叶时，可适当追肥浇水进行催苗，并注意灭草、防病虫，一般苗龄50～60天，当幼苗具有8～10片真叶，苗高7～8厘米时，即可出圃定植。

女贞子该怎样播种育苗？

一般用种子育苗，此外，也可采用扦插、压条等方法生产苗木，后两种方法一般多在春、秋两季进行。下面介绍种子播种育苗法。

1。种子处理每年11～12月采收成熟种子后，装在箩筐中搓去果皮，用清水反复漂洗干净；然后捞出阴干，切忌日晒火烘，以免失去发芽能力。之后即可播种；也可以用湿沙进行层积处理，也就是在室内或其他阴凉处用2份河沙和1份种子混合堆积，待第二年春季播种。种子发芽率约65%～80%。

2。播种育苗女贞子播种育苗有春播和冬播两种。在11～12月份种子成熟时即采即播就是冬播，冬播发芽率较高。春播在每年的2～3月份进行。播种前取出种子，用温水浸种24～48小时，之后捞出、滴干，再进行催芽，待种子萌动后播种。播种时，多采用条播，也可以采用撒播。以条播为好，便于进行苗地管理。于畦床上开沟，沟距15厘米，沟深4～5厘米，将种子均匀播入沟中，覆土厚1～1。5厘米即可。如能覆盖薄膜，能促进种子萌发，提高幼苗的质量。一般每亩播种量冬播新鲜种子为35～40千克，春播用干种子为15～18千克。

3。苗床管理幼苗出土后，及时进行中耕松土，同时将杂草拔除。加强肥水管理，避免苗地受旱或水涝，促进幼苗生长。苗床育苗1～2年即可出圃移栽。

自建小棚进行重楼育苗，冬季如何在室内增温最经济有效？

冬季大棚经济增温方法：

①棚室前挖防寒沟在大棚前沿外侧挖深0。5米、宽0。4米与大棚同长的平底沟，垫入一层旧薄膜，然后填入秸草，上面再盖一层薄膜防漏水。

②棚室上覆盖草帘每天日落后至日出前在棚室上覆盖草帘，草帘的内侧用蒲草或稻草，外侧用芦苇花等联结成厚0。04米、宽2米的覆盖物。也可单用稻草制草帘覆盖，以增强其保温性。

③棚膜内壁涂SN普通薄膜喷涂SN防水滴剂后，膜上就不容易形成水滴，透光率可提高35％左右。这样就可以有效提高棚室内温度，保持棚室内湿度。

重楼种子育苗第二年该盖多少松毛叶？

铺满即可，因为来年价格会更高。

甜瓜如何育苗？

一、选择品种。在品种的选择上，要挑选那些早熟的，高产的，口感好清甜的，抗病能力高的，好运输的品种，现在主要有两个系列是用来主要种植的，一个事皮薄系列，有京香6号，红城10号，红城9号，永田7号，红城15号等，这个系列的瓜口味香甜，肉质脆，有很好的市场，只是不能重茬。另一种是杂交的系列，比如娇雪5号，景甜1号，赛雪8号，等、这个系列不脆，不很香，皮厚，但是比较甜，方便储运。

二、培育壮苗。育苗的时候通常是在保暖型号的温室里，瓜苗育成以后再移栽进大棚里，一般育苗的方法有两种，常规育苗和嫁接育苗。新大棚最好用常规育苗，施用多年的大棚可以用嫁接育苗，能够预防枯萎病。

1、常规育苗。

①培植营养土；营养土的培植有两种。一种是用没有种过瓜类的田土百分之50，和有机肥百分之40，加上百分之10的炉渣混合后过筛；另一种是没中过瓜类的土百分之50，圈粉百分之20，马粪百分之20，和百分之10的炉渣，混合后过筛。

②育苗畦或是育苗钵的准备；在地面挖深11厘米，再整平底部，创面的周围都整成小畦。育苗钵的大小是10厘米乘10厘米，或是8厘米乘10厘米最好，在钵里装满土，基本和钵口持平最好，装好土以后，就把他放进育苗畦里，把水浇足，进行增温，就可以准备进行播种了。

③棚内消毒；在育苗之前的7-11天，每亩用百分之80的敌敌畏0。3千克加上2。5千克的硫磺再加上适量的锯末，分成堆，点燃进行熏棚，消灭虫害，再用百菌清与灭呀的烟剂熏棚，可以消灭病菌。

④种子的处理和催芽；在播种前的2。3天，在阳光下吧种子晒一天，还要多翻动，可以杀菌，和增强种子的活力，打破它的休眠。把晒好的种泡在55-60度的热水里10-16分钟，进行不断的搅拌，温度到30度以后再泡3。4个小时，种种就会慢慢的吸水。水里再放上药剂，搅4。5次。一般用的药剂是多菌灵的500倍液或是福尔马林的400倍液，再把种子洗干净，包上湿布，进行催芽，温度最好在30度左右，过程中要过滤两三次，基本在12个小时就会要漏嘴了，这时候就可以了。

⑤播种；一般在晴天的上午就行播种，在苗床上把营养钵放好，再进行喷水，浇透，水都渗进去以后局可以播种了。每个钵里面放1。2个种子，一边种一边盖一层薄土。都播完以后，要在上面再盖上一层薄塑料膜，用来保湿，保温，苗床的上面扣上小拱棚，在出苗之前不用通风，当有百分之80的种子拱土了就要把膜截掉了。

2、嫁接育苗；先把甜瓜的苗按照10厘米乘10厘米的距离，种在畦里，白子南瓜做砧木，先把南瓜种子种在营养钵里，比甜瓜子晚种20-29天。然后先用刀把砧木上的真叶和侧芽，生长点都去掉，生长点下部0。5厘米的地方线下切个二分之一的斜口，在天瓜苗的生长点的下部1。5厘米的地方向上且个三分之二的斜口，长度都在1厘米。再把它们的斜口对插，同夹子固定好就可以了。

大棚里甜瓜的育苗方法就说完了